Antikörper-Nachweis per ELISA (kompetitiver ELISA)
Die Antigen-beschichteten Reagenzgefäße der Mikrotiterplatte werden mit verdünnten Patientenproben inkubiert. Sind in einer Probe spezifische Antikörper gegen das Antigen, beispielsweise gegen ein Rezeptorprotein, enthalten, binden diese an die Antigen-beschichteten Reagenzgefäße und inhibieren die Bindung eines Biotin-markierten artifiziellen Moleküls, das in einem weiteren Schritt hinzugegeben wird und ebenfalls an das Antigen binden kann. Anschließend wird Peroxidase-markiertes Avidin (Konjugat) hinzugegeben, das an die Biotin-markierten Moleküle bindet. Die Peroxidase katalysiert mit dem im Anschluss hinzugegebenen Peroxidase-Substrat Tetramethylbenzidin (TMB) eine Farbreaktion. Die Intensität der entstehenden Farblösung ist im Messbereich umgekehrt proportional zur Antikörperkonzentration in der Patientenprobe und kann bei quantitativen Tests mithilfe einer Kalibrationskurve in eine Konzentration umgerechnet werden.